Hoe wordt een DNA fingerprint gemaakt?

Antwoord

Kristof

Bij een veel gebruikte manier van het maken van een DNA fingerprint wordt een tiental stukjes DNA specifiek vermenigvuldigd, waarvan we weten dat daar bepaalde stukjes DNA herhaald worden en dat het aantal herhalingen van persoon tot persoon verschilt. Met 'polymerase chain reaction' (PCR) worden die 10 regio's dan vermenigvuldigd. Dat gebeurt met behulp van 10 paren van 'primers' - dat zijn korte stukjes DNA die zo zijn gekozen dat we weten dat die net voor en net na zo'n herhaling aan het DNA binden. Je hebt een zogenoemde 'forward' primer en een 'reverse' primer. Met de een kun je de herhaling van links naar rechts kopieren met de ander van rechts naar links. Na een eerste ronde van kopieren week je het gekopieerde DNA los en laat je de primers opnieuw hechten. Dit kopieren en losweken herhaal je een x-aantal keren en zo maak je van 1, 2 moleculen en dan 4 en dan 8 en dan 16 en zo gaat het exponentieel verder. (dit gebeurt tegenwoordig automatisch een een voorgeprogrammeerd apparaat) Totdat je er zoveel hebt dat je dat zichtbaar kunt maken. Dat doe je door de 10 gevormde DNA fragmentjes op grote te gaan scheiden onder invloed van stroom in een agarose gel. Hoe kleiner het DNA fragment, hoe sneller het door de gel loopt en zo krijgt je na kleuring met een kleurstof die aan DNA bindt een uniek bandenpatroon te zien van 10 streepjes. Door 10 herhalingen van DNA te bekijken die van persoon tot persoon verschillen kun je met een zekerheid van 99,99% zeggen dat wanneer twee stalen eenzelfde bandenpatroon laten zien, het om dezelfde persoon gaat.

Samengevat doe je drie stappen: (1) je isoleert DNA uit lichaamsmateriaal, bijvoorbeeld uit cellen die in wangslijm zitten, (2) je voert een PCR reactie uit, (3) je scheidt de gevormde 10 fragmenten op grootte in een agarose gel en je krijgt een uniek bandenpatrool. Dit alles kan als het moet binnen de 24 uur. Maar reken erop dat iemand hier normaal enkele dagen mee bezig is.

PCR uitleggen zonder tekening is moeilijk. Kijk daarom ook maar eens in wikipedia waar je meer uitleg over PCR vindt met tekeningen erbij. En op Youtube zijn filmpjes terug te vinden over agarose gel electroforese (het proces om DNA fragmentjes op grootte te scheiden.